- همه نشریات
- نشریات علمی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویچ کشاورزی
- مجلات ترویجی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- سایر نشریات سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- نشریات علمی انجمن ها
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی
پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 283 |
| تعداد نشریات سازمان | 81 |
| تعداد شماره‌ها | 2,727 |
| تعداد مقالات | 31,057 |
| تعداد مشاهده مقاله | 28,349,194 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 16,272,308 |
یک روش ساده، سریع و مقرون بصرفه برای تخلیص تریپسین از پانکراس گوساله | ||
| تحقیقات دامپزشکی و فرآورده‌های بیولوژیک | ||
| شناسنامه علمی شماره، دوره 24، شماره 1، فروردین 1390، صفحه 33-39 اصل مقاله (378.6 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/vj.2011.101105 | ||
| نویسندگان | ||
| بهمن غلامحسین گودرزی* 1؛ محبوبه طالبی2؛ رویا باقریان3؛ رضا حاجی حسینی2 | ||
| 1موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، بخش بیوشیمی و پروتئومیکس، کرج | ||
| 2گروه زیست شناسی- بیوشیمی، دانشگاه پیام نور، تهران | ||
| 3گروه بیوشیمی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران | ||
| چکیده | ||
| ترپسین از جمله آنزیم هایی است که در فرآیندهای بیوتکنولوژی کاربرد فراوان دارد. در آزمایشگاه کشت سلولی، طی فرآیند پاشاژ سلول ها، تریپسین جهت جدا کردن سلول های چسبیده شده به دیواره ظرف کشت سلولی استفاده می شود. همچنین جهت جدا کردن سلول ها از یک بافت می توان از تریپسین استفاده کرد. تریپسین در فرایند تولید پپتن و پروتئین هیدرولیز شده از کازئین شیر و سویا بطور انبوه و گسترده مورد استفاده قرار می شگیرد(21،1). تریپسین یک سرین پروتئاز است که در سیستم گوارش اکثر مهره داران یافت می شود ترپسین از جمله آنزیم هایی است که در فرآیندهای بیوتکنولوژی کاربرد فراوان دارد. در این مطالعه با استفاده از روش های رسوب دهی پروتئین ها با سولفات آمونیوم اشباع شده 35 درصد و 75 درصد، رسوب دهی با تری کلرو استیک اسید 5/2 درصد وزنی حجمی، رسوب دهی پروتئین ها در 5/6=pH و در نهایت با کروماتوگرافی تمایلی تریپسین موجود در پانکراس تخلیص شد. با این روش، از هر کیلو گرم پانکراس گوساله 8/2 گرم تریپسین خالص با فعالیت ویژه (U/mg) 155 استحصال گردید. نتایج این مطالعه نشان میدهد که با این روش می توان 26 درصد از آنزیم موجود در پانکراس را بدست آورد. در نهایت می توان گفت این روش یک روش ساده، سریع و مقرون به صرفه جهت تولید انبوه تریپسین باشد. | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| A simple, fast and commercial method for trypsin purification from bovine pancreas | ||
| نویسندگان [English] | ||
| B.GH Goudarzi1؛ M Talebi2؛ R Bagherian3؛ R HajiHosseini2 | ||
| 1Razi Vaccine and Serum Research Institute | ||
| 2Biology Section, Payame noor University | ||
| 3Biochemistry Section ov Medicine Faculty, Tehran University | ||
| چکیده [English] | ||
| Trypsin is a serine protease found in the digestive system of many vertebrates, where it hydrolyses proteins. Trypsin has been used widely in various biotechnological processes. In this study trypsin was purified using two precipitation cut, 35% and 75% as saturation percent of Ammonium sulfate solutions, TCA precipitation (2.5% W/V), pH precipitation and finally affinity chromatography. This method could be used to obtain 2.8 g purified trypsin with specific activity 155 U/mg and 26% recovery from 1kg bovine pancreas. Therefore, this method is a simple, fast and commercial method for scale-up of trypsin extraction from bovine pancreas. | ||
| مراجع | ||
|
1- Bond, J.S. (1989) Commercially Available Proteases, Appendix II. In: Proteolytic Enzymes, A Practical Approach. R.J. Beynon and J.S. Bond, eds., IRL Press, Oxford, U.K.
2- Bradford, M.M. (1976) A rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of proteins utilizing the principle of protein dye binding. Anal. Biochem. 72: 248– 254.
3- Bricteux, S., Gregoire, G. (1966) Study of trypsinogen and trypsin of sheep pancreas. BBA. 127: 277-281.
4- Bricteux, S., Gregoire, G. (1968) Study of trypsinogen and trypsin of goat pancreas. Arch. Intern. Physiol. Biochim. 76: 571-74.
5- Charles, M. (1963) Extraction and characterization of trypsin from pig pancreas. BBA. 69: 115- 121.
6- Erlanager,B., Kokowsky,N., Cohen,W. (1961) The preparation and properties of two new chromogenic stubstrates of trypsin. ArchBiochem. Biophys. 95: 271-77.
7- Harvis, I., Hofmann, T. (1969) Isolation and characterization of trypsin from horse pancreas. Biochim. J. 114: 82 P.
8- Haynes, R., Winter, W.P. (1968) Purification and characterizationof gar (Dog- Fish) trypsin. BBA. Personal communication.
9- Jellouli,K., Bougatef,A., Daassi,D., Balti,R., Barkia,A., Nasri,M. (2009) New alkaline trypsin from the intestine of Grey triggerfish (Balistes capriscus) with high activity at low temperature: Purification and characterization. Food Chemistry 116: 644–650.
10- Kunitz,M., and Northrop,J. (1936) Isolation from beef pancreas of crystalline trypsinogen, trypsin, a trypsin inhibitor and an inhibitor- trypsin compound. J Gen Physiol. 19: 991-98.
11- Laemmli U.K. (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227: 680-85.
12- Layne, E. (1957) Spectrophotometric and Turbidimetric Methods for Measuring Proteins. Methods in Enzymology 3: 447-455.
13- Northrop,J., Kunitz,M. (1932) Crystalline trypsin. I. Isolation and tests of Purity. J Gen Physiol. 16: 267-75.
14- Polg.r,L. (2005) The catalytic triad of serine peptidases. Cell. Mol. Life Sci. 62: 2161–72.
15- Rawlings ND, Barrett A.J. (1994) Families of serine peptidases”. Meth. Enzymol. 244: 19–61.
16- Rice,R.H. (1977) Stabilization of bovine trypsin by reductive methylation. Biochem. Biophys. Acta. 492: 316–21.
17- Stoscheck, CM. (1990) Quantitation of Protein. Methods inEnzymology 182: 50-69.
18- Tub G., Nerli B., Pic´G. (2007) Partitioning features of bovine trypsin and chymotrypsin in polyethyleneglycol-sodium citrate aqueous two-phase systems. Journal of Chromatography B. 852: 244–249.
19- Walker J.M. (1996) SDS polyacrylamide gel electrophoresis ofproteins. In the protein protocols hand book. Humana Press. Oxford, U.K, pp28-47.
20- Wilimowska,A., (1978) A simple method for purification trypsin, Analytical Biochemistry. 90: 816-20.
21- Wilkinson, J.M. (1986) Fragmentation of Polypeptides by EnzymicMethods. I Practical Protein Chemistry: A Handbook. A. Darbre, ed., John Wiley and Sons, New York, N.Y.
22- Woodard,S., Mayor,J., Bailey,M., Barker,D., Love,R.J. (2003) Applications of Proteolytic Enzymes in industrials. Biotechnol. Appl.Biochem. 38: 123-139.
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 3,049 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 2,858 |
||
سامانه مدیریت نشریات علمی. قدرت گرفته از سیناوب