| تعداد نشریات | 285 |
| تعداد نشریات سازمان | 83 |
| تعداد شمارهها | 3,110 |
| تعداد مقالات | 34,666 |
| تعداد مشاهده مقاله | 49,826,240 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 80,171,488 |
Preparation of antigens from midgut of Hyalomma anatolicum anatolicum and determining their immunoprotective effects | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 7، دوره 63، شماره 2، مهر 2008، صفحه 47-52 اصل مقاله (416.45 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2008.103743 | ||
| نویسندگان | ||
| M. Abdigoudarzi؛ A. Dadmehr؛ F. Golchinfar؛ R. Madani* 1، 2 | ||
| 1Proteomics and Biochemistry Department, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. | ||
| 2Department of Microbiology, School of Specialized Veterinary Science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. | ||
| چکیده | ||
| Partially fed (4 -5 days) H .a. anatolicum (Iranian isolate) female adult ticks were used for preparation of antigens of midgut which are, the gut supernate antigen (GS), gut membrane antigen (GM), triton extracted gut membrane antigen ( TX-GM ) and sodium dodecyl sulphate treated Triton extracted gut membrane antigen (SDS-TX-GM). The New Zealand white rabbits were immunized with GS, GM, TX- GM and SDS-TX-GM antigens. The first inoculation on day 0 was administered after emulsification with Freund`s complete adjuvant and second inoculation was given on day 14 with incomplete Freund`s adjuvant and third inoculation was given on day 28 with incomplete Freund`s adjuvant. Blood drawn was from the marginal ear vein on day 38. The humoral immune response was studied by Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) and antibody titers in the sera of immunized rabbits on 10 days after the last booster dose of antigen was 1/32000. After electrophoresis of purified midgut antigens (GS, GM, TX-GM, SDS-TX-GM) 4µg of each were applied on a 10% acryl amide gel and blotted to nitrocellulose paper for reaction with its concern immune sera. By analysis of this Western blot, we got bands of 110, 95, 85, 66, 59, 49, 42 Kda for GSAg, 95, 85, 66, 49, 42 Kda for GM Ag, 66, 49 Kda for TX-GMAg and 66Kda for SDS-TX-GMAg responsible for induction of resistance in the host. The prepared antigens showed engorged nymphs ranged from 32-41%, 29-56%, 29-49% and 29-47% in response to GS, GM, TX-GM and SDS-TX-GM antigens respectively. Immunodominant antigenic proteins of 66 Kda were detected in the sera of rabbits immunized by all above antigens which can be candidate for single immunogen if in future studies show acceptable results. The immunized rabbits were challenged, 10 days after the last booster dose of antigens, with 700 larvae of H. a. anatolicum ticks by releasing them on one ear of rabbits and maximum protection in rabbits against H. a. anatolicum was induced with the one immunized with GSAg. | ||
| کلیدواژهها | ||
| Hyalomma anatolicum anatolicum؛ Midgut؛ Western blot؛ ELISA | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| تهیه آنتی ژنهای روده میانی کنه هیالوما جهت بررسی ایمنی زایی آنها | ||
| نویسندگان [English] | ||
| محمد عبدی گودرزی؛ ا. دادمهر؛ فریبا گلچین فر؛ | ||
| چکیده [English] | ||
| کنه های هیالومای بالغ ماده که از مناطق مختلف ایران جداشده و بصورت محدودی تغذیه شده اند جهت تهیه آنتی ژنهای مختلف از روده میانی مورد استفاده قرار گرفتند. این آنتی ژنها عبارتند از سوپ روده میانی (GS) ، غشاء روده میانی (GM)، غشاء استخراج شده بوسیله تریتون (TX-GM) و بکارگیری سدیم دودسیل سولفات بر روی غشاء استخراج شده بوسیله تریتون (SDS-TX-GM). چند خرگوش جهت تزریق این آنتی ژن ها انتخاب شده وبا یک برنامه ایمونیزاسیون در روزهای 0 و14 و 28 بطور جداگانه ایمن شده و در روز 38 از هریک خونگیری شده وسرم خون هریک جدا گردید. تیتر آنتی بادی سرم ها با الایزا سنجیده شده که به رقت 32000/1 نیز رسید، ضمناَ درصد نمف های خون خورده جهت جداشدن، عبارتست از: 32-41% و 29 -56% و 29-49% و 29- 47% در رابطه با آنتی ژنهایGS , GM TX-GM , SDS-TX-GM. سپس با انجام وسترن بلات برای هریک از آنتی ژنها, تظاهر باند مربوطه با نمایش وزن مولکولی های جداگانه مشخص گردید که در مجموع آنتی ژن مشترک ایمونودومیننت با وزن مولکولی 66 کیلو دالتون در همه دیده شد. سپس هریک از خرگوشها با تعداد 700 لارو مورد چالش قرار گرفتند که با ریزش آنها ایمن شدن آنها بوسیله آنتی ژنها مورد تائید قرارگرفت. | ||
| کلیدواژهها [English] | ||
| روده میانی, کنه هیالوما آناتولیکوم, وسترن بلات, الایزا | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 14,988 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 54,682 |
||