| تعداد نشریات | 283 |
| تعداد نشریات سازمان | 81 |
| تعداد شماره‌ها | 2,729 |
| تعداد مقالات | 31,084 |
| تعداد مشاهده مقاله | 29,392,320 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 16,373,941 |
Construction of a human recombinant polyclonal Fab fragment antibody library using peripheral blood lymphocytes of snake bitten victims | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 5، دوره 70، شماره 4، اسفند 2015، صفحه 255-261 اصل مقاله (1012.61 K) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.7508/ari.2015.04.005 | ||
| نویسندگان | ||
| M.H. Motedayen1؛ G. Nikbakht* 2؛ M.J. Rasaee3؛ A. Zare Mirakabadi4 | ||
| 1Department of Immunization and Plasma Production, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Karaj, Iran | ||
| 2Department of Microbiology and Immunology, School of veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran | ||
| 3Department of Medical Biotechnology, School of Medicine, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran | ||
| 4Department of Venomous Animals and Antivenom Production, Razi vaccine and serum research institute, Karaj, Iran | ||
| چکیده | ||
| Human snake bitten poisoning is a serious threat in many tropical and subtropical countries such as Iran. The best acceptable treatment of envenomated humans is antivenoms; however they have a series of economic and medical problems and need more improvements. In this study a combinatorial human immunoglobulin gene library against some of Iranian snakes venoms was constructed. Total RNA prepared from peripheral blood lymphocytes of two recovered snake victims. RT-PCR was used for cDNA synthesis and amplification of the heavy (Fd segment) and kappa light chains of IgG antibody. After digestion of the heavy chain with SpeI and XhoI and light chain with XbaI and SacI enzymes, inserted successively into the cloning vector pComb3x, and then recombinant vector transformed to TG1 bacteria to construct the Fab library. For determination insertion rate of Fab segment into cloning vector, plasmids of 12 clones of library were extracted and digested with SfiI. Length of amplified Fd and κ chains, were 650 - 750 bp. Primary library size was determined to contain 4.9×105 members out of which half of them contained the same size of Fab fragment. This result is comparable to some researchers and shows that this method could be appropriate tool for the production of human polyclonal Fab fragment antibodies for management of poisonous snake bitted victims. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Fab؛ Combinatorial library؛ snake؛ PComb3x؛ Immunoglobulin | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| ساخت کتابخانه قطعه فب آنتی بادی پلی کلونال نوترکیب انسانی با استفاده از لنفوسیت های خون محیطی مصدومین مارگزیده | ||
| نویسندگان [English] | ||
| محمدحسن متدین1؛ غلامرضا نیکبخت بروجنی2؛ محمدجواد رسایی3؛ عباس زارع میرک آبادی4 | ||
| چکیده [English] | ||
| مسمومیت ناشی از مارگزیدگی در انسان در بسیاری از کشورهای گرمسیری و نیمه گرمسیری یک تهدید جدی محسوب می گردد. بهترین درمان قابل قبول برای اشخاص مارگزیده استفاده از پادزهرها می باشد. با این حال این پادزهرها بدلیل یکسری مشکلات اقتصادی و پزشکی نیاز به بهبود بیشتری دارند. در این تحقیق، یک کتابخانه ژنی ترکیبی انسانی برعلیه تعدادی از مارهای زهری ایرانی ساخته شده است. RNA تام از لنفوسیتهای خون محیطی دو نفر از مصدومین مارگزیده بهبود یافته تهیه شد. از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز ترنس کریپتاز معکوس برای ساخت cDNA و ازدیاد زنجیره های سنگین(Fd) و سبک کاپای ایمونوگلوبولین جی استفاده شد. بعد از هضم زنجیره Fd با آنزیمهای SpeI و XhoI و همچنین زنجیره کاپا با آنزیمهای XbaI و SacI، این زنجیره ها به طور پشت سرهم به داخل حامل pComb3x کلون شدند و سپس برای ساخت کتابخانه فب، این حاملهای نوترکیب به داخل باکتری تی جی یک رانده شدند. برای تعیین تعداد وکتورهای حاوی قطعه فب، پلاسمیدهای دوازده پرگنه کتابخانه استخراج و بعد با آنزیم SfiI هضم گردیدند. طول زنجیره های Fd و کاپای تکثیر شده 650 تا 750 جفت باز بود. تعداد اعضای اولیه کتابخانه 105×9/4 تعیین گردید که نیمی از آنها حاوی قطعه ای به اندازه قطعه فب بودند. این نتیجه، با نتیجه تحقیق بعضی از محققین دیگر مشابهت داشته و نشان می دهد که این روش می تواند اسباب مناسبی برای تولید قطعه فب آنتی بادی پری کلونال انسانی برای استفاده در درمان مصدومین مارگزیده باشد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| فب, Fab, کتابخانه ترکیبی, مار, PComb3x, پادتن | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 7,073 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,871 |
||