| تعداد نشریات | 284 |
| تعداد نشریات سازمان | 82 |
| تعداد شماره‌ها | 3,050 |
| تعداد مقالات | 34,082 |
| تعداد مشاهده مقاله | 46,549,380 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 77,602,453 |
شناسایی پروتئین‌های راپتری4(ROP4)و انولاز2 توکسوپلاسما گوندی به عنوان آنتی ژن‌های غالب ایمنی در گوسفند | ||
| تحقیقات دامپزشکی و فرآورده‌های بیولوژیک | ||
| مقاله 13، دوره 31، شماره 2، تیر 1397، صفحه 99-107 اصل مقاله (1.69 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله کامل | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/vj.2018.116620.1403 | ||
| نویسندگان | ||
| محمدتقی احدی1؛ رسول مدنی* 2، 3؛ ناصر حقوقی راد1؛ احمدرضا اسماعیلی رستاقی4 | ||
| 1گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران | ||
| 2بخش پروتئومیکس و بیوشیمی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران. | ||
| 3گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران، ایران. | ||
| 4بخش انگل شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران | ||
| چکیده | ||
| توکسوپلاسما گوندی (Toxoplasma gondii)، تک یاخته مهم و پاتوژن اجباری درون سلولی است که در میزبانان واسط (مهره‌داران خونگرم) ایجاد عفونت توکسوپلاسموزیس حاد و مزمن می‌نماید. توکسوپلاسموز مادرزادی در انسان و گوسفند در دوران بارداری منجر به سقط جنین می‌شود. به منظور تهیه داروهای شیمیایی و تولید واکسن موثر علیه عفونت توکسوپلاسموز و همچنین تهیه مارکرهای تشخیصی قوی و مناسب برای استفاده در تکنیک‌های سرولوژیکی، مولکولی، شناسایی پروتئین‌های تاکی زوئیت‌های توکسوپلاسما گوندی اهمیت زیادی دارد. هدف از انجام این تحقیق، شناسایی و معرفی پروتئین‌های آنتی‌ژنیک و ایمونوژنیک غالب ایمنی توکسوپلاسما گوندیی در گوسفند با استفاده از تکنیک ایمونوپروتئومیکس بود. برای تهیه تاکی زوئیت‌ها، تعداد 30 سر موش سوری (C57BL/6) ماده بالغ 7-5 هفته به انگل توکسوپلاسما گوندی آلوده شدند. پروتئین‌های تاکی‌زوئیت‌ها با روش سونیکاسیون استخراج گردید. غلظت پروتئین‌ها به روش بردفورد تعیین شد. از 10 راس گوسفند آلوده به توکسوپلاسما گوندی، سرم حاوی آنتی‌بادی ضد توکسوپلاسما تهیه گردید. مراحل الکتروفورز دوبعدی 2-DE-SDS-PAGE، وسترن بلاتینگ و ایمنوبلاتینگ اجرا شد. با انطباق دادن تصاویر ژل‌های 2-DE و ایمنوبلاتینگ، اسپات‌های مربوط به پروتئین‌های آنتی‌ژنیک و ایمنوژنیک غالب ایمنی شناسایی و مورد برش و با روش‌های مس اسپکترومتری MS/MS و MALDI-TOF/MS مورد آنالیز قرار گرفت و پروتئین‌های انولاز 2 و پروتئین راپتری 4 (ROP4) شناسایی شد. این دو پروتئین می‌توانند به عنوان مارکرهای تشخیصی در تکنیک‌های سرولوژیکی مانند الایزا و نیز در تولید واکسن علیه عفونت توکسوپلاسموز مورد استفاده قرار بگیرند. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| توکسوپلاسما گوندی؛ پروتئین راپتری4؛ انولاز2؛ آنتی‌ژن غالب ایمنی؛ گوسفند؛ ایمونوپروتئومیکس | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Identification of Toxoplasma gondii ROP4 and Enolase2 Proteins as Immunodominant Antigens in Sheep | ||
| نویسندگان [English] | ||
| M.T. Ahady1؛ R. Madani2، 3؛ N. Hoghooghi-Rad1؛ A.R. Esmaeili Rastaghi4 | ||
| 1Department of Microbiology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. | ||
| 2Proteomics and Biochemistry Department, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. | Department of Microbiology, School of Specialized Veterinary Science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. | ||
| 3Proteomics and Biochemistry Department, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. | Department of Microbiology, School of Specialized Veterinary Science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. | ||
| 4Department of Parasitology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. | ||
| چکیده [English] | ||
| Toxoplasma gondii is an important intracellular and obligatory protozoan that causes acute and chronic toxoplasmosis in warm-blooded hosts including sheep and humans. This infection can lead to stillbirth among pregnant women and ewes. Identification and detection of Toxoplasma gondii tachyzoites proteins especially antigenic and immunogenic proteins is crucial and essential for producing efficacious and potent drugs and vaccines against toxoplasmosis, and also for introducing efficient diagnostic markers. The aim of this study was to identify the antigenic and immunodominant immunogenic proteins of Toxoplasma gondii in sheep using immunoproteomic techniques.Thirty C57BL/6 mice (male, 5-7 weekly) were selected for providing Toxoplasma gondii tachyzoites. Proteins of tachyzoites were collected using sonication method and the concentration of the proteins was determined by Bradford method. On the other hand, ovine serum containing anti-Toxoplasma gondii antibodies was collected from 10 infected sheep. Then 2-DE-SDS-PAGE electrophoresis, western blotting and immune blotting techniques were carried out. Finally, it was specified and distinguished the spots which belonged to immunogenic and antigenic proteins on the gels, and the proteins were identified by mass spectrometry (MS/MS, MALDI-TOF/MS). The identified two proteins were enolase 2 and rhoptry protein 4 (ROP4).These immunodominant immunogenic and antigenic proteins have potential of being used as markers in serological diagnostic techniques and they may candidate vaccine against Toxoplasma gondii infection. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| Toxoplasma gondii, Rhoptry protein4, Enolase2, Immunodominant Antigens, Immunoproteomics, Sheep | ||
| مراجع | ||
|
1. Ahady M.T. 2017. The study and identification of antigenic and immunodominant immunogenic proteins of Toxoplasma gondii in sheep and man using immunoproteomics procedure. PhD thesis. Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 852 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 591 |
||