- همه نشریات
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- مجلات ترویجی
- نشریات انجمن ها
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات ترویجی کشاورزی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی پژوهشی
- نشریات علمی پژوهشی سازمان تحقیقات, آموزش و ترویچ
- نشریات علمی ترویجی
آمار
| تعداد نشریات | 273 |
| تعداد نشریات سازمان | 72 |
| تعداد شماره‌ها | 1,645 |
| تعداد مقالات | 18,936 |
| تعداد مشاهده مقاله | 10,473,193 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 7,893,269 |
تعیین توالی نوکلئوتیدی ژن F سویه واکسینالClone IR ویروس نیوکاسل موسسه رازی | ||
| تحقیقات دامپزشکی و فرآورده‌های بیولوژیک | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده ، انتشار آنلاین از تاریخ 22 خرداد 1398 | ||
| نوع مقاله: مقاله کامل | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/vj.2018.123538.1504 | ||
| نویسندگان | ||
آیدین ملوکی  1؛ ایوب سلیمی2
| ||
| 1بخش بیماریهای طیور، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج | ||
| 2مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی | ||
| چکیده | ||
| ویروس نیوکاسل یکی از مهمترین ویروس های صنعت طیور می باشد. استفاده گسترده از واکسن های زنده و غیر فعال نیوکاسل تا حد زیادی سطح ایمنی را ایجاد می کند. پروتئین فیوژن یکی از پروتئین های مهم این ویروس نقش مهمی در تعیین حدت ویروس دارد. بدین منظور در این مطالعه از کلون IR 12 که از سویه لاسوتا به روش پلاک اسی در موسسه رازی با موفقیت تهیه شده بود، استفاده شد. ابتدا ویروس به تخم مرغ SPFده روزه تزریق شد. باند ویروس از مایع آلانتوئیک با کمک سانتریفوژ دور بالاو گرادیانت ساکارز به صورت مناسب تخلیص شد. RNA ویروسی با کیت تجاری مناسب استخراج شد. وقطعهcDNA ساخته شد یک جفت پرایمر طراحی شد و PCR انجام شد،همه محصول از روی ژل الکتروفورز استخراج و بر روی پلاسمید pJET1.2 به نسبت 3 به یک کلون شد، در ادامه به میزبان مناسب ترانسفورم شد. پس از تکثیر پلاسمید استخراج گردید. برای اطمینان از کلونینگ موفق آنزیم برش BglII استفاده شد. پس از این مرحله با طراحی پرایمر های مناسب، پلاسمید برای تعیین توالی به روش سنگر به شرکت تجاری معتبر ارسال شد. در نهایت نتایج با استفاده از نرم افزار مگا6 کل توالی ژنومی این پروتئین تعیین شد و سکانس نقطه شکست 112G-R-Q-G-R-L117 بدست آمده و درخت فیلوژنتیک ترسیم شد. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| نیوکاسل؛ سویه کلون؛ پلاسمید؛ تعیین توالی؛ ژنوم | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Sequencing of the F gene of Razi Institute's vaccinal NDV strain Clone IR12 | ||
| نویسندگان [English] | ||
| Aidin Molouki1؛ سلیمی salimi2 | ||
| 1Department of avian disease research and diagnostic | ||
| 2Razi Vaccine and Serum Research Institute | ||
| چکیده [English] | ||
| Newcastle disease virus is an important virus in poultry industry. Use of killed or attenuated vaccine against the disease elevates immunological protection. The F gene is a major determinant in virulence of the virus. Therefore, in this study we aimed to sequence the F gene of Razi LaSota-derived and plaque-purified NDV strain IR12 and analyse it. The virus was inoculated in 10-day-old SPF embryonated chicken eggs and then the allantoic fluid was subjected to sucrose gradient purification using ultra centrifuge. The purified virus band was then subjected to RNA extraction and cDNA synthesis using gene specific primers. PCR was run using specific primers to amplify the F gene and then the band was gel extracted and cloned to pJet1.2 plasmid in a 3 to 1 ratio and transformed to a suitable competent cell. The extracted plasmid was then digested with BglII restriction enzyme to confirm the presence of the insert and then the plasmid was Sanger sequenced. The sequence was then assembled using MEGA6, the cleavage-site sequence of 112G-R-Q-G-R-L117 was obtained and then the phylogenetic tree was drawn. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| Newcastle disease virus, LaSota strain, Cloning, Sequencing | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 6 |
||
