| تعداد نشریات | 284 |
| تعداد نشریات سازمان | 82 |
| تعداد شماره‌ها | 3,050 |
| تعداد مقالات | 34,082 |
| تعداد مشاهده مقاله | 46,549,302 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 77,602,371 |
Extraction, Purification, and Characterization of Trypsin Obtained from the Digestive System of Yellowfin Seabream (Acanthopagrus latus) | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقاله 10، دوره 74، شماره 4، اسفند 2019، صفحه 405-411 اصل مقاله (271.32 K) | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2018.122854.1229 | ||
| نویسندگان | ||
| F. Namjou1؛ S. Yeganeh* 1؛ R. Madani2؛ H. Ouraji1 | ||
| 1Department of Fisheries, Faculty of Animal Sciences and Fisheries, Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University (SANRU), Sari, Iran | ||
| 2Department of Proteomics & Biochemistry section Biotechnology, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| چکیده | ||
| The development of the marine aquaculture industry has led to the generation of significant amounts of fish wastes. Marine farm wastes exert adverse effects on the surrounding area of the cages. On the other hand, wastes of fish and other aquatic animals are regarded as major sources of valuable natural bioactive compounds, including enzymes, proteins, bioactive peptides, oil, amino acids, collagen, gelatin, calcium, biopolymers, and water-soluble minerals. To investigate the potential of marine fish waste, the whole digestive system of yellowfin seabream (Acanthopagrus latus) was extracted for extraction and identification of trypsin enzyme. Fish (179.93±93.67 g; 184±28.17 cm) were caught from the Persian Gulf and stored at -20 °C. Yellowfin seabream were dissected and their whole digestive systems were removed. Samples were thoroughly washed with distilled water and purified through defatting using acetone and ammonium sulfate precipitation. The following issues were assessed: the total and specific activity of trypsin, protein determination, molecular weight, enzyme activity and stability in different pH values and temperatures. The obtained results indicated that specific activity and protein content of trypsin enzyme were 4.4 U and 3.4 mg/ml, respectively. The molecular weight of 23 kDa was reported for trypsin using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) method. Maximum activity and stability of trypsin were observed at 60°C and 45°C, respectively. Trypsin demonstrated maximum activity and stability at a pH value of 8.0. In general, the results of the current study suggested that trypsin extracted from the digestive system of yellowfin seabream has considerable potential for industrial applications, such as the food industry, owing to its characteristics and stability under alkaline conditions. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Enzyme purification؛ Yellowfin seabream (Acanthopagrus latus)؛ Trypsin؛ Fish waste | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| استخراج، خالص سازی و شناسایی ویژگی‌های تریپسین حاصل از سیستم گوارش ماهی شانک زرد باله (Acanthopagrus latus) | ||
| چکیده [English] | ||
| توسعه صنعت آبزی‌پروری دریایی منجر به تولید مقادیر قابل‌توجهی از ضایعات آبزیان شده است. ضایعات مزارع دریایی اثرات بدی بر محیط اطراف قفس‌ها می‌گذارند. از طرف دیگر ضایعات ماهی‌ها و سایر موجودات دریایی به‌عنوان منبع عظیمی از ترکیبات زیست فعال باارزشی شامل آنزیم‌ها، پروتئین‌ها، پپتیدهای زیست فعال، روغن، آمینواسید، کلاژن، ژلاتین، کلسیم، بیوپلیمرها و مواد معدنی محلول در آب شناخته می‌شوند. برای بررسی پتانسیل موجود در ضایعات ماهی‌ها، دستگاه گوارش ماهی شانک زرد باله (Acanthopagrus latus) جهت استخراج و شناسایی آنزیم تریپسین، استخراج گردید. ماهی‌ها (میانگین وزن 67/93±93/179 گرم و میانگین طول 67/93±184 سانتی‌متر) از خلیج‌فارس صید شده و در دمای 20- نگهداری شدند. ماهی‌های شانک زرد باله کالبدشکافی شده و کل دستگاه گوارش آن‌ها خارج گردید. نمونه‌ها به‌طور کامل با آب مقطر شسته شدند و از طریق چربی زدایی با استون و ترسیب با آمونیوم سولفات خالص‌سازی انجام شد. مواردی که مورد بررسی قرار دادیم شامل فعالیت کل و فعالیت اختصاصی تریپسین، پروتئین سنجی، وزن مولکولی، فعالیت آنزیمی و پایداری در pH متفاوت و فعالیت آنزیمی و پایداری در دماهای متفاوت بود. نتایج نشان داد که فعالیت اختصاصی و محتوای پروتئین آنزیم تریپسین به ترتیب U 4/4 و mg/ml 4/3 بود. وزن مولکولی آنزیم تریپسین با استفاده از روش SDS-PAGE معادل 23 کیلو دالتون تعیین گردید. حداکثر فعالیت و پایداری تریپسین به ترتیب در دمای 60 و 45 درجه سانتی گراد مشاهده گردید. تریپسین بالاترین فعالیت و پایداری را در pH برابر با 8 نشان داد. به‌طور کلی این مطالعه نشان داد که تریپسین استخراج شده از دستگاه گوارش ماهی شانک زرد باله با توجه به مشخصات آن و پایداری در شرایط قلیایی، دارای پتانسیل بالایی برای استفاده در صنایع غذایی و سایر صنایع است. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| خالص‌سازی آنزیم, شانک زرد باله (Acanthopagrus latus), تریپسین, ضایعات ماهی | ||
| مراجع | ||
|
Bkhairia, I., Ben Khaled, H., Ktari, N., Miled, N., Nasri, M., Ghorbel, S., 2016. Biochemical and molecular characterisation of a new alkaline trypsin from Liza aurata: Structural features explaining thermal stability. Food Chem 196, 1346-1354.
Canada, S., 2009. Human Activity and the Environment: Annual Statistics. Minister responsible for Statistics Canada.
Candiotto, F.B., Freitas-Junior, A.C.V., Neri, R.C.A., Bezerra, R.S., Rodrigues, R.V., Sampaio, L.A., et al., 2018. Characterization of digestive enzymes from captive Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus. Braz J Biol 78, 281-288.
Dos Santos, C.W.V., da Costa Marques, M.E., de Araujo Tenorio, H., de Miranda, E.C., Vieira Pereira, H.J., 2016. Purification and characterization of trypsin from Luphiosilurus alexandri pyloric cecum. Biochem Biophys Rep 8, 29-33.
FAO, 2016. The state of world fisheries and aquaculture, contributing to food security and nutrition for all. Rome.
Ketnawa, S., Benjakul, S., Ling, T.C., Martinez-Alvarez, O., Rawdkuen, S., 2013. Enhanced recovery of alkaline protease from fish viscera by phase partitioning and its application. Chem Cent J 7, 79.
Khandagale, A.S., Mundodi, L., Sarojini, B.K., 2017. Isolation and characterizati on of trypsin from fish viscera of Oil Sardine) Sardinella longiceps). Int J Fish Aquat Stud 5, 33-37.
Khandagale, A.S., Sarojini, B.K., Kumari, S.N., Joshi, S.D.S., Nooralabettu, K., 2015. Isolation, Purification, and Biochemical Characterization of Trypsin from Indian Mackerel (Rastralliger kanagurta). J Aquat Food Prod Technol 24, 354-367.
Khangembam, B.K., Chakrabarti, R., 2015. Trypsin from the digestive system of carp Cirrhinus mrigala: purification, characterization and its potential application. Food Chem 175, 386-394.
Khantaphant, S., Benjakul, S., 2010. Purification and characterization of trypsin from the pyloric caeca of brownstripe red snapper (Lutjanus vitta). Food Chem 120, 658-664.
Kim, M., Jeong, Y., 2013. Purification and Characterization of a Trypsin-Like Protease from Flatfish (Paralichthys olivaceus) Intestine. J Food Biochem 37, 732-741.
Ktari, N., Ben Khaled, H., Nasri, R., Jellouli, K., Ghorbel, S., Nasri, M., 2012. Trypsin from zebra blenny (Salaria basilisca) viscera: Purification, characterisation and potential application as a detergent additive. Food Chem 130, 467-474.
Lordan, S., Ross, R.P., Stanton, C., 2011. Marine bioactives as functional food ingredients: potential to reduce the incidence of chronic diseases. Mar Drugs 9, 1056-1100.
Lowry, O.H., Rosebrough, N.J., Farr, A.L., Randall, R.J., 1951. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem 193, 265-275.
Rani, K., Rana, R., Datt, S., 2012. Review on latest overview of proteases. Int J Life Sci 2, 12-18.
Sawant, R., Nagendran, S., 2014. Protease: An enzyme with multiple industrial application. World J Pharm Sci 6, 568-579.
Shahidi, F., Janak Kamil, Y.V.A., 2001. Enzymes from fish and aquatic invertebrates and their application in the food industry. Trends Food Sci Tech 12, 435-464.
Silva, J.F., Esposito, T.S., Marcuschi, M., Ribeiro, K., Cavalli, R.O., Oliveira, V., et al., 2011. Purification and partial characterisation of a trypsin from the processing waste of the silver mojarra (Diapterus rhombeus). Food Chem 129, 777-782.
Vahabnezhad, A., Taghavimotlagh, S.A., Ghodrati Shojaei, M., 2017. Growth pattern and reproductive biology of Acanthopagrus latus from the Persian Gulf. J Survey Fish Sci 4, 18-28.
Yazawa, K., Numata, K., 2014. Recent advances in chemoenzymatic peptide syntheses. Molecules 19, 13755-13774. | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 15,372 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 55,377 |
||