- همه نشریات
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- مجلات ترویجی کشاورزی
- نشریات انجمن ها
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی
- نشریات علمی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویچ کشاورزی
آمار
| تعداد نشریات | 277 |
| تعداد نشریات سازمان | 76 |
| تعداد شماره‌ها | 2,015 |
| تعداد مقالات | 23,149 |
| تعداد مشاهده مقاله | 12,321,905 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 10,020,690 |
سکانس کامل سویهClone12 IR مشتق شده از سویه لاسوتا ویروس نیوکاسل مؤسسه رازی به روش کلونینگ | ||
| تحقیقات دامپزشکی و فرآورده‌های بیولوژیک | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 05 مهر 1399 اصل مقاله (1.44 MB) | ||
| نوع مقاله: مقاله کامل | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/vj.2020.128090.1632 | ||
| نویسندگان | ||
ایوب سلیمی  ؛ آیدین ملوکی؛ حسین گودرزی؛ سید رضا ابراهیمی؛ محمد مجید ابراهیمی؛ بهمن خالصی
| ||
| مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران | ||
| چکیده | ||
| در چند سال اخیر بیماری نیوکاسل در صنعت طیور خسارات گسترده‌ای از جهت تلفات و افت تولید در مزارع پرورشی گوشتی، تخمگذار و مادر گوشتی در کشور ایجاد نموده است؛ استفاده گسترده از واکسن‌های زنده و غیر فعّال نیوکاسل سطح ایمنی را تا حد زیادی ایجاد می‌کند، امّا هنوز بیماری نیوکاسل مسئله مهمی در کشورهای در حال توسعه نظیر ایران می‌باشد. تحقیق حاضربا هدف تعیین توالی کامل ویروس نیوکاسل به عنوان پیش‌نیاز تولید یک واکسن نوترکیب مؤثر نیوکاسل، می‌تواند زمینه لازم برای انجام این مهم را فراهم نماید. بدین‌منظور از کلون IR 12 این سویه لاسوتا که قبلاً به روش پلاک اسی در مؤسسه رازی با موفقیت کلون شده بود، استفاده شد. ابتدا ویروس به تخم مرغ SPF ده روزه تزریق شد. مایع آلانتوئیک با کمک سانتریفوژ دور بالاو گرادیانت ساکارز به صورت مناسب تخلیص شد. RNA ویروسی با کیت تجاری مناسب استخراج شد. با استفاده از دو پرایمر (GSP) دو قطعهcDNA ساخته شد. بدون درنظرگرفتن جایگاه ژنی 7 جفت پرایمر طراحی و PCR انجام شد.هر محصولPCR طولی برابر با kb5/2-2را شامل می‌شد. همه محصول از روی ژل الکتروفورز استخراج و بر روی پلاسمید pJET1.2 به نسبت سه به یک کلون شد، در ادامه به میزبان مناسب ترانسفورم شد. پس از تکثیر پلاسمید استخراج گردید. برای اطمینان از کلونینگ موفق آنزیم برش Bgl II استفاده شد. پلاسمیدها برای تعیین توالی به روش سنگر به شرکت تجاری معتبر ارسال شد. در نهایت با استفاده از نرم‌افزارهای مگا، تمام 15186 نوکلئوتید تعیین توالی گردید. نقاط شروع و پایان هر ژن مشخص شد. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| ویروس بیماری نیوکاسل؛ واکسن نوترکیب؛ کلون کردن؛ تعیین توالی | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| Determination of the complete nucleotide sequence of Clone IR 12 strain derived from the LaSota strain of Newcastle Virus of Razi Institute | ||
| نویسندگان [English] | ||
| A. Salimi؛ A. Molouki؛ H. godarzi؛ S. R. Ebrahimi؛ M. M. Ebrahimi؛ B. Khalesi | ||
| Razi Serum and Vaccine Research Institute, Karaj, Iran | ||
| چکیده [English] | ||
| Newcastle disease (ND) is an important viral disease of poultry severe economic losses and drop in egg production in broiler and layers flocks. Despite vaccination with both live attenuated and inactivated NDV strains to immunize birds, ND is still a serious problem in poultry industry especially in developing countries like Iran. The present study was conducted as a part of our effort to produce an effective recombinant vaccine to provide better control of the disease. In order to produce a recombinant NDV with LaSota backbone the first thing to do is sequencing the LaSota in hand. Therefore, plaque purified NDV strain clone IR12 produced by Razi Institute was propagated in 10-day-old SPF eggs, the allantoic fluid was harvested and then the virus was purified using sucrose-gradient. RNA was extracted and cDNA spanning the whole genome was synthesized using two GSP primers. PCR was run using 7 sets of primers covering the whole cDNA.The PCR products were all gel extracted and ligated to pJET1.2 vector by 3-1 ratios. Successful cloning of each insert was confirmed using restriction enzyme BglII that digests areas flanking the insert in pJET. After confirmation, the inserts were sequenced using Sanger sequencing with pJEt specific primers as well as primers designed to bind to middle regions of each fragment. Sequence of the whole 15186 bp genome was determined by assembling sequences using MEGA software. Location of each start (S) and ending (E) gene signals as well as all ORF start and termination codons were determined. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| Newcastle disease virus, recombinant vaccine, cloning, sequencing | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 3 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1 |
||
