- همه نشریات
- نشریات علمی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویچ کشاورزی
- مجلات ترویجی سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- سایر نشریات سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
- نشریات علمی انجمن ها
- علوم آب و خاک
- علوم اقتصاد و ترویج کشاورزی
- علوم جنگل, مرتع و آبخیزداری
- علوم دامی و شیلات
- علوم زراعی و باغی
- علوم گیاهپزشکی
- علوم مهندسی و مکانیزاسیون کشاورزی
- نشریات با زبان انگلیسی
- نشریات با زبان فارسی
- نشریات دانشگاه آزاد اسلامی
- نشریات علمی
پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 281 |
| تعداد نشریات سازمان | 80 |
| تعداد شماره‌ها | 2,464 |
| تعداد مقالات | 28,462 |
| تعداد مشاهده مقاله | 16,775,628 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 12,915,069 |
Diagnosis of Pebrine Disease in Silkworm Using Molecular Methods | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 05 آذر 1401 | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2022.360434.2581 | ||
| نویسندگان | ||
Masoumeh Bagheri   1؛ Azadeh Zahmatkesh1؛ Mojtaba Moharrami2؛ Shahla Nematollahian3؛ Maryam Torkaman1
| ||
| 1Razi Vaccine and Serum Research Institute (RVSRI), Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. | ||
| 2Razi vaccine and Serum Research Institute (RVSRI), Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran | ||
| 3Iran Silkworm Research Center (ISRC) Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Rasht, Iran. | ||
| چکیده | ||
| Since, pebrine disease as the most important and dangerous disease of silkworms, spreads horizontally through the spores and vertically through the eggs, combating the disease and eliminating it completely from livestock production has been associated with many problems. The aim of this project was to identify the molecular cause of pebrine disease in silkworms using a sensitive, specific and accurate method. So, a 136 bp fragment was selected based on the Nosema bombycis (N. bombycis) partial SSU rDNA sequence and a pair of primers was designed. Then, using the conventional PCR method, the target fragment was amplified and sequenced. After that, to determine the detection sensitivity, using the Real-Time PCR method, 5-fold serial dilutions of N. bombycis DNA were prepared, and the last dilution that produced a fluorescent signal was considered as the minimum detection limit. All tests were performed in duplicates. Based on the results of the sensitivity test, the standard curve including Ct values and DNA concentration was used for analysis. Also, 80 unknown samples examined by light microscope, were evaluated using conventional PCR and Real-Time PCR. Both PCR results showed no amplification for the negative control samples. The findings demonstrated that the lowest detection limit for N. bombycis was less than 6 pg of DNA; while, this amount was 8 ng for conventional PCR. From 80 samples examined, 55, 60 and 62 samples were positive, for light microscope, conventional and Real-Time PCR methods, respectively. The findings suggested that the Real-Time PCR method has a higher ability to detect the causative agent of pebrine disease than the conventional PCR method, and both methods are superior to light microscopy. Therefore, due to the fewer steps and higher accuracy of Real-Time PCR, it can be introduced as a suitable method for diagnosing pebrine disease. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Silkworm؛ Pebrine disease؛ Nosema bombycis؛ Real-Time PCR method | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| تشخیص بیماری پبرین در کرم ابریشم با استفاده از روش های مولکولی | ||
| چکیده [English] | ||
| از آنجایی که بیماری پبرین به عنوان مهم ترین و خطرناک ترین بیماری کرم ابریشم به صورت افقی از طریق اسپور و به صورت عمودی از طریق تخم گسترش می یابد، مبارزه با این بیماری و حذف کامل آن از تولیدات دامی با مشکلات زیادی همراه بوده است. هدف از این پروژه شناسایی مولکولی عامل بیماری پبرین در کرم ابریشم با استفاده از روشی حساس، اختصاصی و دقیق بود. بنابراین، یک قطعه 136 جفت باز بر اساس توالی SSU rDNA نوزما بامبیسیس انتخاب و یک جفت پرایمر طراحی شد. سپس با استفاده از روش PCR معمولی قطعه هدف تکثیر و توالی یابی شد. پس از آن، برای تعیین حد تشخیص، با استفاده از روش Real-Time PCR، رقت‌های سریالی 5 برابری از DNA نوزما بامبیسیس. تهیه شد و آخرین رقت که سیگنال فلورسنت تولید می‌کرد، به عنوان حداقل حد تشخیص در نظر گرفته شد. تمامی تست ها با دوتکرارانجام شد. بر اساس نتایج آزمون حساسیت، از منحنی استاندارد شامل مقادیر Ct و غلظت DNA برای آنالیز استفاده شد. همچنین 80 نمونه مشکوک که با میکروسکوپ نوری بررسی شده بودند، با استفاده از PCR معمولی و Real-Time PCR نیز مورد ارزیابی قرار گرفتند. هر دو روش PCR هیچ تکثیری را برای نمونه های کنترل منفی نشان ندادند. یافته ها نشان داد که کمترین حد تشخیص برای نوزما بامبیسیس کمتر از 6 pg DNA بود. در حالی که این مقدار برای PCR معمولی 8 نانوگرم بود. از 80 نمونه بررسی شده، 55، 60 و 62 نمونه به ترتیب برای روش های میکروسکوپ نوری، PCR معمولی و Real-Time PCR مثبت بودند. یافته ها حاکی از آن است که روش Real-Time PCR نسبت به روش PCR معمولی توانایی بالاتری در تشخیص عامل بیماری پبرین دارد و هر دو روش PCR نسبت به میکروسکوپ نوری برتری دارند. بنابراین با توجه به مراحل کمتر و دقت بالاتر Real-Time PCR می توان آن را به عنوان روشی مناسب برای تشخیص بیماری پبرین معرفی کرد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| کرم ابریشم, بیماری پبرین, نوزما بامبیسیس, روش Real-Time PCR | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 20 |
||
سامانه مدیریت نشریات علمی. قدرت گرفته از سیناوب