| تعداد نشریات | 286 |
| تعداد نشریات سازمان | 84 |
| تعداد شماره‌ها | 2,999 |
| تعداد مقالات | 33,582 |
| تعداد مشاهده مقاله | 44,284,207 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 21,917,150 |
Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests | ||
| Archives of Razi Institute | ||
| مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 21 آبان 1403 اصل مقاله (1.31 M) | ||
| نوع مقاله: Original Articles | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22092/ari.2024.367086.3346 | ||
| نویسندگان | ||
| Mahdi Babaie* 1؛ Nader Mosavari2؛ Mohammad Fazilati1 | ||
| 1Department of Biology, Payame Noor University, Tehran, Iran | ||
| 2Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Tehran, Iran | ||
| چکیده | ||
| Glanders is a contagious infectious disease caused by Burkholderia mallei that affects both solipeds and carnivores. This disease occasionally leads to human infection through direct contact between humans and infected animals. The recent rise in the prevalence of glanders has caused a focus on control and eradication programs, emphasizing accurate diagnosis of infected cases using a high-performance test. To this end, antigenic proteins were purified from Burkholderia mallei, and the mallein test was then optimized using the purified proteins. Finally, the efficacy of antigenic proteins was evaluated using the complement fixation test (CFT). The laboratory strain of B. mallei was selected and the proteins of inactivated bacteria were precipitated using ammonium sulfate (AS) and trichloroacetic acid (TCA). An optimal precipitation method was selected, and the proteins were purified using size exclusion chromatography (SEC) and high-performance liquid chromatography (HPLC). Brute mallein was also prepared to compare the results. The protein profile of the samples was analyzed using SDS-PAGE. The mallein test was also performed, and the results were evaluated using CFT. The AS method was selected as the optimal precipitation method. The protein profile exhibited a range of proteins from low to high molecular weights, appearing as a smear in the brute mallein. The mallein test using the AS-participated proteins, the first fraction from SEC, and the second fraction from HPLC yielded significant results, demonstrating erythema with a diameter of 18.46, 21.70 and 25.37 mm, respectively. The mallein test results were confirmed by CFT. The findings suggested that the purified antigenic proteins improved the mallein test and CFT results. Consequently, these proteins can be used to diagnose glanders correctly and increase the accuracy of the mallein test and CFT. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| Burkholderia mallei؛ Glanders؛ Mallein test؛ Chromatography؛ Complement fixation test | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| جداسازی و خالص سازی پروتئینهای آنتیژنیک از بورخولدریا مالئی و استفاده از آن در تستهای تشخیصی | ||
| چکیده [English] | ||
| مشمشه یک بیماری عفونی واگیردار است که توسط بورخولدریا مالئی ایجاد می‌گردد و تک‌سُمیان و همچنین گوشتخواران را درگیر می‌کند. این بیماری گاهی اوقات از طریق تماس مستقیم بین انسان و حیوانات آلوده، به انسان سرایت می‌کند. با توجه به افزایش شیوع مشمشه در چند سال اخیر، برنامه کنترل و ریشه‌کنی مورد توجه قرار گرفته است و تشخیص درست موارد آلوده توسط تستی با کارایی بالا حائز اهمیت است. در این راستا پروتیئن‌های آنتیژنیک از بورخولدریا مالئی خالص‌سازی گردید و آزمون مالئین با این پروتئین‌ها بهینه‌سازی شد. در نهایت اثربخشی پروتئینهای آنتیژنیک در تست ثبوت مکمل (CFT) ارزیابی گردید. سویه آزمایشگاهی بورخولدریا مالئی انتخاب شد و پروتئینهای باکتری‌های غیرفعال شده، با استفاده از تری‌کلرواستیک اسید (TCA) و آمونیوم سولفات (AS) ترسیب شدند. بهترین روش ترسیبی انتخاب گردید و پروتئینهای آن با استفاده از کروماتوگرافی اندازه‌ای (SEC) و کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) تخلیص شدند. جهت مقایسه نتایج، مالئین بروت نیز تهیه گردید. پروفایل پروتئینی نمونه‌ها توسط SDS-PAGE بررسی گردید. آزمون مالئین انجام گرفت و نتایج توسط CFT ارزیابی شد. روش AS به عنوان بهترین روش ترسیبی انتخاب شد. پروفایل پروتئینی، پروتئین‌هایی در محدوده سبک تا سنگین را نشان داد که در مالئین بروت به صورت اسمیر ظاهر گردید. آزمایش مالئین با پروتئینهای ترسیبی توسط AS و فراکسیون اول از SEC و فراکسیون دوم از HPLC نتایج معنی‌داری داشت و به ترتیب قطر اریتمایی با اندازه mm 46/18، 70/21 و 37/25 ایجاد شد. CFT نتایج آزمون مالئین را تایید کرد. پروتئینهای خالص‌شده آنتیژنیک موجب بهبود نتایج آزمون مالئین و CFT شد. در نتیجه می‌توان از این پروتئین‌ها در جهت تشخیص درست مشمشه استفاده کرد و صحت نتایج آزمون‌هایی مانند مالئین و CFT را افزایش داد. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| بورخولدریا مالئی, مشمشه, آزمون مالئین, کروماتوگرافی, آزمون ثبوت مکمل | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 109 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 99 |
||