اخبار و اعلانات

 آمار

تعداد نشریات284
تعداد نشریات سازمان82
تعداد شماره‌ها3,079
تعداد مقالات34,325
تعداد مشاهده مقاله47,463,980
تعداد دریافت فایل اصل مقاله78,433,256
Babaie, Mahdi, Mosavari, Nader, Fazilati, Mohammad. (1404). Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests. سامانه مدیریت نشریات علمی, 80(3), 683-692. doi: 10.32592/ARI.2025.80.3.683
Mahdi Babaie; Nader Mosavari; Mohammad Fazilati. "Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests". سامانه مدیریت نشریات علمی, 80, 3, 1404, 683-692. doi: 10.32592/ARI.2025.80.3.683
Babaie, Mahdi, Mosavari, Nader, Fazilati, Mohammad. (1404). 'Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests', سامانه مدیریت نشریات علمی, 80(3), pp. 683-692. doi: 10.32592/ARI.2025.80.3.683
Babaie, Mahdi, Mosavari, Nader, Fazilati, Mohammad. Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests. سامانه مدیریت نشریات علمی, 1404; 80(3): 683-692. doi: 10.32592/ARI.2025.80.3.683

Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests

Archives of Razi Institute
مقاله 17، دوره 80، شماره 3، مرداد و شهریور 2025، صفحه 683-692    اصل مقاله (592.86 K)
نوع مقاله: Original Articles
شناسه دیجیتال (DOI): 10.32592/ARI.2025.80.3.683
نویسندگان
Mahdi Babaie* 1؛ Nader Mosavari2؛ Mohammad Fazilati1
1Department of Biology, Payame Noor University, Tehran, Iran
2Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Tehran, Iran
چکیده
Glanders is a contagious infectious disease caused by Burkholderia mallei that affects both solipeds and carnivores. This disease occasionally leads to human infection through direct contact between humans and infected animals. The recent rise in the prevalence of glanders has caused a focus on control and eradication programs, emphasizing accurate diagnosis of infected cases using a high-performance test. To this end, antigenic proteins were purified from Burkholderia mallei, and the mallein test was then optimized using the purified proteins. Finally, the efficacy of antigenic proteins was evaluated using the complement fixation test (CFT). The laboratory strain of B. mallei was selected and the proteins of inactivated bacteria were precipitated using ammonium sulfate (AS) and trichloroacetic acid (TCA). An optimal precipitation method was selected, and the proteins were purified using size exclusion chromatography (SEC) and high-performance liquid chromatography (HPLC). Brute mallein was also prepared to compare the results. The protein profile of the samples was analyzed using SDS-PAGE. The mallein test was also performed, and the results were evaluated using CFT. The AS method was selected as the optimal precipitation method. The protein profile exhibited a range of proteins from low to high molecular weights, appearing as a smear in the brute mallein. The mallein test using the AS-participated proteins, the first fraction from SEC, and the second fraction from HPLC yielded significant results, demonstrating erythema with a diameter of 18.46, 21.70 and 25.37 mm, respectively. The mallein test results were confirmed by CFT. The findings suggested that the purified antigenic proteins improved the mallein test and CFT results. Consequently, these proteins can be used to diagnose glanders correctly and increase the accuracy of the mallein test and CFT.
کلیدواژه‌ها
Burkholderia mallei؛ Glanders؛ Mallein test؛ Chromatography؛ Complement fixation test
عنوان مقاله [English]
جداسازی و خالص سازی پروتئینهای آنتیژنیک از بورخولدریا مالئی و استفاده از آن در تستهای تشخیصی
چکیده [English]
مشمشه یک بیماری عفونی واگیردار است که توسط بورخولدریا مالئی ایجاد می‌گردد و تک‌سُمیان و همچنین گوشتخواران را درگیر می‌کند. این بیماری گاهی اوقات از طریق تماس مستقیم بین انسان و حیوانات آلوده، به انسان سرایت می‌کند. با توجه به افزایش شیوع مشمشه در چند سال اخیر، برنامه کنترل و ریشه‌کنی مورد توجه قرار گرفته است و تشخیص درست موارد آلوده توسط تستی با کارایی بالا حائز اهمیت است. در این راستا پروتیئن‌های آنتی‌ژنیک از بورخولدریا مالئی خالص‌سازی گردید و آزمون مالئین با این پروتئین‌ها بهینه‌سازی شد. در نهایت اثربخشی پروتئین‌های آنتی‌ژنیک در تست ثبوت مکمل (CFT) ارزیابی گردید.
سویه آزمایشگاهی بورخولدریا مالئی انتخاب شد و پروتئین‌های باکتری‌های غیرفعال شده، با استفاده از تری‌کلرواستیک اسید (TCA) و آمونیوم سولفات (AS) ترسیب شدند. بهترین روش ترسیبی انتخاب گردید و پروتئین‌های آن با استفاده از کروماتوگرافی اندازه‌ای (SEC) و کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) تخلیص شدند. جهت مقایسه نتایج، مالئین بروت نیز تهیه گردید. پروفایل پروتئینی نمونه‌ها توسط SDS-PAGE بررسی گردید. آزمون مالئین انجام گرفت و نتایج توسط CFT ارزیابی شد.
روش AS به عنوان بهترین روش ترسیبی انتخاب شد. پروفایل پروتئینی، پروتئین‌هایی در محدوده سبک تا سنگین را نشان داد که در مالئین بروت به صورت اسمیر ظاهر گردید. آزمایش مالئین با پروتئین‌های ترسیبی توسط AS و فراکسیون اول از SEC و فراکسیون دوم از HPLC نتایج معنی‌داری داشت و به ترتیب قطر اریتمایی با اندازه mm 46/18، 70/21 و 37/25 ایجاد شد. CFT نتایج آزمون مالئین را تایید کرد.
پروتئین‌های خالص‌شده آنتی‌ژنیک موجب بهبود نتایج آزمون مالئین و CFT شد. در نتیجه می‌توان از این پروتئین‌ها در جهت تشخیص درست مشمشه استفاده کرد و صحت نتایج آزمون‌هایی مانند مالئین و CFT را افزایش داد.
کلیدواژه‌ها [English]
بورخولدریا مالئی, مشمشه, آزمون مالئین, کروماتوگرافی, آزمون ثبوت مکمل
مراجع
  1. GLANDERS AND MELIOIDOSIS: WHO; 2024.
  2. Nasiri M, Zarrin A, RoshankarRudsari S, Khodadadi J. Glanders (Burkholderia mallei infection) in an Iranian man: A case report. IDCases. 2023;32:e01779.
  3. Van Zandt KE, Greer MT, Gelhaus HC. Glanders: an overview of infection in humans. Orphanet journal of rare diseases. 2013;8(1):131.
  4. Khan I, Wieler L, Melzer F, Elschner MC, Muhammad G, Ali S, et al. Glanders in animals: a review on epidemiology, clinical presentation, diagnosis and countermeasures. Transboundary and emerging diseases. 2013;60(3):204-21.
  5. Tikmehdash HT, Dehnad A, Mosavari N, Hokmabadi BN, Mahmazi S, editors. Isolation, serological and molecular methods in screening of Burkholderia mallei in East Azerbaijan province, Iran. Veterinary Research Forum; 2024.
  6. Abnaroodheleh F, Mosavari N, Pourbakhsh S, Tadayon K, Jamshidian M. Identification of Burkholderia mallei Isolates with Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism. Archives of Razi Institute. 2023;78(4):1305.
  7. Babaie M, Mosavari N, Fazilati M. Isolation and purification of the Burkholderia mallei antigenic proteins and its use in diagnostic tests. Archives of Razi Institute. 2024.
  8. de Carvalho Filho MB, Ramos RM, Fonseca Jr AA, de Lima Orzil L, Sales ML, de Assis Santana VL, et al. Development and validation of a method for purification of mallein for the diagnosis of glanders in equines. BMC Veterinary Research. 2012;8(1):154.
  9. Abreu DC, Gomes AS, Tessler DK, Chiebao DP, Del Fava C, Romaldini AHdCN, et al. Systematic monitoring of glanders-infected horses by complement fixation test, bacterial isolation, and PCR. Veterinary and animal science. 2020;10:100147.
  10. Karimi A, Mosavari N. Development of Rose Bengal test against mallein test for rapid diagnosis of equine glanders. Tropical Animal Health and Production. 2019;51(7):1969-74.
  11. Shakibamehr N, Mosavari N, Harzandi N, Mojgani N. Designing of western blot technique for glanders diagnosing in Iran. Journal of Equine Veterinary Science. 2021;99:103403.
  12. Pal V, Kumar S, Malik P, Rai GP. Evaluation of recombinant proteins of Burkholderia mallei for serodiagnosis of glanders. Clinical and Vaccine Immunology. 2012;19(8):1193-8.
  13. Lafontaine ER, Chen Z, Huertas-Diaz MC, Dyke JS, Jelesijevic TP, Michel F, et al. The autotransporter protein BatA is a protective antigen against lethal aerosol infection with Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Vaccine: X. 2019;1:100002.
  14. Dashtipour S, Tadayon K, Yazdansetad S, Mosavari N, Keshavarz R. Genomic pattern analysis of Burkholderia mallei field isolates by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) discriminatory typing. Iranian journal of microbiology. 2021;13(5):574.
  15. Yazdansetad S, Mosavari N, Tadayon K, Mehregan I. Development of an immunoblotting assay for serodiagnosis of Burkholderia mallei infection: the whole-cell proteome-based paradigm. Iranian Journal of Microbiology. 2019;11(3):232.
  16. Mojgani N, Babaie M, Shakibamehr N, Mohammad Taheri M, Mosavari N, Ghaempanah A, et al. Purification and biological analysis of specific antigens (ESAT6/CFP10) from Mycobacterium tuberculosis. Iranian Journal of Veterinary Science and Technology. 2020;12(2):59-67.
  17. Mosavari N, Karimi A, Tadayon K, Zavaran Hosseini A, Babaie M. Evaluation of heating and irradiation methods for production of purified protein derivative (PPD) of mycobacterium tuberculosis. Archives of Razi Institute. 2020;75(4):439.
  18. Elschner MC, Laroucau K, Singha H, Tripathi BN, Saqib M, Gardner I, et al. Evaluation of the comparative accuracy of the complement fixation test, Western blot and five enzyme-linked immunosorbent assays for serodiagnosis of glanders. PLoS One. 2019;14(4):e0214963.
  19. Poudineh Morref M, Koohi MK, Alimolaei M, Emami T, Hassan J. A new practical purification method for type d clostridium perfringens epsilon toxin by Size-Exclusion Chromatography (SEC) and Ultrafiltration (UF). Iranian Journal of Veterinary Medicine. 2022;16(2):178-87.
  20. Khorrami R, Pooyanmehr M, Soroor MEN, Gholami S. Evaluation of Some Aflatoxins in Feed Ingredients of Livestock and Poultry by HPLC Method, A Local Study in Kermanshah Province. Iranian Journal of Veterinary Medicine. 2022;16(3).
  21. Webster G, Jones C, Mullins AJ, Mahenthiralingam E. A rapid screening method for the detection of specialised metabolites from bacteria: induction and suppression of metabolites from Burkholderia species. Journal of Microbiological Methods. 2020;178:106057.
  22. Babaie M, Mehrabi Z, Mollaei A. Partial purification and characterization of antimicrobial effects from snake (Echis carinatus), scorpion (Mesosobuthus epues) and bee (Apis mellifera) venoms. Iranian Journal of Medical Microbiology. 2020;14(5):460-77.
  23. Chromý V, Vinklárková B, Šprongl L, Bittová M. The Kjeldahl method as a primary reference procedure for total protein in certified reference materials used in clinical chemistry. I. A review of Kjeldahl methods adopted by laboratory medicine. Critical reviews in analytical chemistry. 2015;45(2):106-11.
  24. Babaie M, Zolfagharian H, Zolfaghari M, Jamili S. Biochemical, hematological effects and complications of Pseudosynanceia melanostigma envenoming. Journal of pharmacopuncture. 2019;22(3):140.
  25. Verma R, Venkateswaran K, Sharma J, Agarwal G. Potency of partially purified malleo-proteins for mallein test in the diagnosis of glanders in equines. Veterinary microbiology. 1994;41(4):391-7.
  26. Silva KPCd, Takaki GMdC, Silva LBGd, Saukas TN, Santos AS, Mota RA. Assessment of the effectiveness of the PPD-mallein produced in Brazil for diagnosing glanders in mules. Brazilian Journal of Microbiology. 2013;44:179-88.
  27. Naureen A, Saqib M, Muhammad G, Hussain MH, Asi MN. Comparative evaluation of Rose Bengal plate agglutination test, mallein test, and some conventional serological tests for diagnosis of equine glanders. Journal of veterinary diagnostic investigation. 2007;19(4):362-7.
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 244
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 347


counter
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب