1Department of Biology, Faculty of Biological Sciences, Islamic Azad University, Tehran North Branch, Tehran, Iran
2Department of Microbiology, Faculty of Biological Science, Islamic Azad University Tehran North Branch
3Department of Mycology, Tehran Science and Research Branch, Tehran, Iran
چکیده
The emergence of fluconazole-resistant C. glabrata presents a critical challenge in antifungal therapy, underscoring the urgent need for alternative treatment strategies. C. glabrata, an opportunistic yeast-like fungus, is increasingly problematic due to its high resistance to common antifungals like fluconazole, driven by mechanisms such as efflux pump overexpression. This resistance compromises treatment efficacy and leads to higher mortality rates, prolonged hospital stays, and increased healthcare costs. This study focuses on the fabrication and evaluation of polyvinyl alcohol-nystatin-thymol (PVA-NYS-THY) nanofibrous scaffolds as a novel antifungal approach against fluconazole-resistant C. glabrata. Clinical isolates of C. glabrata were identified and assessed for resistance using a combination of culture methods, molecular assays, and antifungal susceptibility testing. PVA-NYS-THY nanofibers were produced via electrospinning, yielding uniform fibers with an average diameter of approximately 100 nm, confirmed through scanning electron microscopy. Fourier transform infrared spectroscopy confirmed the successful incorporation of the desired functional groups within the scaffold structure. The effect of the nanofibers on the expression of secreted aspartyl proteinases (SAP) and agglutinin-like sequence (ALS) genes in C. glabrata was evaluated via real-time PCR. The release kinetics of the scaffolds were also characterized, and antifungal efficacy was determined through minimum inhibitory concentration (MIC) assays. PVA-NYS-THY scaffolds exhibited favorable release profiles and significantly downregulated the expression of ALS and SAP genes in C. glabrata. The MIC values for PVA-NYS-THY, PVA-NYS, and PVA-THY were 7.81, 15.62, and 62.5 µg/mL, respectively, demonstrating the superior antifungal activity of the PVA-NYS-THY formulation. These findings suggest that PVA-NYS-THY nanofibrous scaffolds offer a promising and effective antifungal therapy for fluconazole-resistant C. glabrata, providing a novel and potentially impactful solution to overcome current therapeutic limitations.
ساخت و ارزیابی داربستهای نانوفیبری PVA-NYS-THY به عنوان عوامل ضد قارچی علیه کاندیدا گلابراتای مقاوم به فلوکونازول
چکیده [English]
ظهور کاندیدا گلابراتای مقاوم به فلوکونازول، چالشی بحرانی در درمانهای ضد قارچی ایجاد کرده و نیاز فوری به راهکارهای درمانی جایگزین را آشکار میسازد. کاندیدا گلابراتا، قارچ فرصتطلب شبه مخمری، به دلیل مقاومت بالا در برابر داروهای ضد قارچی رایج مانند فلوکونازول، که ناشی از مکانیسمهایی مانند بیان بیش از حد پمپهای برونریز است، به طور فزایندهای مشکلساز شده است. این مقاومت، اثربخشی درمان را به خطر انداخته و منجر به افزایش میزان مرگ و میر، طولانی شدن مدت بستری در بیمارستان و افزایش هزینههای درمانی میشود. این مطالعه بر ساخت و ارزیابی داربستهای نانوفیبری پلی وینیل الکل-نیستاتین-تیمول (PVA-NYS-THY) به عنوان رویکردی نوین علیه کاندیدا گلابراتای مقاوم به فلوکونازول تمرکز دارد. نمونههای بالینی کاندیدا گلابراتا با استفاده از ترکیبی از روشهای کشت، آزمایشهای مولکولی و تستهای حساسیت ضد قارچی شناسایی و ارزیابی شدند. نانوفیبرهای PVA-NYS-THY از طریق الکتروریسی تولید شدند که منجر به تولید فیبرهای یکنواخت با قطر متوسط حدود 100 نانومتر شد و توسط میکروسکوپ الکترونی روبشی تأیید گردید. طیفسنجی مادون قرمز فوریه، گنجاندن موفق گروههای عاملی مورد نظر در ساختار داربست را تأیید کرد. تأثیر نانوفیبرها بر بیان ژنهای پروتئینازهای ترشحی آسپارتیل (SAP) و توالی شبه آگلوتینین (ALS) در کاندیدا گلابراتا از طریق PCR زمان واقعی ارزیابی شد. همچنین سینتیک رهایش داربستها مشخص و اثربخشی ضد قارچی از طریق آزمایشهای حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) تعیین شد. داربستهای PVA-NYS-THY پروفایلهای رهایش مطلوبی نشان دادند و به طور قابل توجهی بیان ژنهای ALS و SAP را در کاندیدا گلابراتا کاهش دادند. مقادیر MIC برای PVA-NYS-THY، PVA-NYS و PVA-THY به ترتیب ۷.۸۱، ۱۵.۶۲ و ۶۲.۵ میکروگرم بر میلیلیتر بود که نشاندهنده فعالیت ضد قارچی برتر فرمولاسیون PVA-NYS-THY است. این یافتهها نشان میدهد که داربستهای ننانوفیبری PVA-NYS-THY یک درمان ضد قارچی امیدوارکننده و مؤثر برای کاندیدا گلابراتا مقاوم به فلوکونازول ارائه میدهند و یک راهحل جدید و بالقوه مؤثر برای غلبه بر محدودیتهای درمانی فعلی فراهم میکنند.
کلیدواژهها [English]
فعالیت ضد قارچی, مواد زیستسازگار, دارورسانی, نیستاتین, تیمول
آمار
تعداد مشاهده مقاله: 13
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 18
سامانه مدیریت نشریات علمی. طراحی و پیاده سازی از سیناوب